Из журналов: JLR

Новый вариант контроля холестерина в конкретном месте и лучший способ оценить статус витамина D в отделениях интенсивной терапии. Прочтите о статьях по этим темам, недавно опубликованных в журналеЖурнал исследований липидов.

Холестерин является важным компонентом клеточных мембран млекопитающих. Его неэстерифицированная или свободная форма, локализованная в плазме, контролирует механические свойства липидного бислоя, такие как жесткость и проницаемость. Холестерин также напрямую взаимодействует с широким спектром клеточных белков на плазматической мембране, регулируя тем самым передачу сигналов в клетках.

Исследователи манипулируют уровнями клеточного холестерина либо посредством химической экстракции и обогащения холестерина метил-бета-циклодекстрином, либо аддуктами MβCD и MβCD-холестерин соответственно; или путем ингибирования биосинтеза нового клеточного холестерина статинами. Эти методы удобны, но им не хватает локального контроля уровня холестерина внутри клеток. Более того, они могут вызывать неспецифическое истощение холестерина, что оказывает вредное воздействие на клетки, включая гибель клеток и неспецифические изменения физиологии клеток.

Ха Фам и группа исследователей из Иллинойского университета в Чикаго и Университета Западной Австралии в Перте разработали новую систему, которая позволяет индуцировать локальное истощение холестерина. Они создали генетически кодируемую бактериальную холестериноксидазу, чья мембраносвязывающая активность изменена таким образом, что позволяет пространственно-временно специфично контролировать ее нацеливание на мембрану путем химически индуцированной димеризации с белком-партнером, расположенным в определенном месте мембраны. Команда задокументировала систему и свои выводы в недавней исследовательской работе, опубликованной в журналеЖурнал исследований липидов.

В сочетании с количественной визуализацией холестерина и анализом сигнальной активности эта новая система позволит однозначно определять сайт-специфические функции холестерина в различных клеточных мембранах, включая плазматическую мембрану и лизосомальную мембрану.

Витамин D помогает регулировать уровень кальция и фосфора, играет роль в поддержании правильной структуры костей и регулирует иммунную функцию. Дефицит витамина D приводит к заболеваниям костей, таким как рахит, а также раковым и сердечно-сосудистым заболеваниям, а также связан с повышенным риском респираторных инфекций, включая COVID-19.

При поглощении организмом витамин D метаболизируется до 25-гидроксивитамина D или 25OH-D, который часто используется в качестве биомаркера для измерения уровня витамина D в организме. Жидкостная хроматография-тандемная масс-спектрометрия, или ЖХ-МС/МС, является золотым стандартом количественного определения 25OH-D, и этот метод имеет ряд преимуществ по сравнению с ранее использовавшимися иммуноанализами, включая большую селективность, более низкие пределы обнаружения и повышенную точность.

Исследователи из Университета Макмастера и Детской больницы Исследовательского института Восточного Онтарио разработали высокопроизводительный метод оценки статуса витамина D по образцам крови, основанный на прямой инфузии – МС/МС или ДИ-МС/МС, после клик-дериватизации с использованием 2-МС. нитрозопиридин, который оптимизирован для более быстрого анализа, чем ЖХ-МС/МС, и большей точности, чем коммерческий иммуноанализ.

В сравнительном тестовом исследовании Эрик Хельмеци и его команда обнаружили, что концентрации 25OH-D в эталонных образцах крови, измеренные с помощью DI-MS/MS, были менее предвзятыми, чем коммерческий иммуноанализ по сравнению с LC-MS/MS. Они обнаружили, что по сравнению с DI-MS/MS коммерческий иммуноанализ, часто используемый для скрининга в клинических испытаниях, недооценивает распространенность дефицита витамина D у детей в критическом состоянии, которым могли бы помочь высокие дозы добавок витамина D.

Эти выводы, опубликованные в статье в журналеЖурнал Lipid Research показывает, что DI-MS/MS может быть используется для быстрой и надежной оценки статуса витамина D в клинических и крупномасштабных исследованиях. Исследователи сосредоточат будущие усилия на адаптации этого метода для целей отчетности о клинических значениях.